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高速振蕩樣品前處理器也叫脈沖均質(zhì)器，屬于無(wú)菌均質(zhì)器的一種，不同于拍擊式均質(zhì)器，高速振蕩樣品前處理器采用一種變革性的新技術(shù)，通過(guò)高頻率震動(dòng)內裝樣品的均質(zhì)袋，產(chǎn)生強烈沖擊波與高速攪動(dòng)聯(lián)合作用，使樣品得到均質(zhì)。在微生物檢測樣本制備中，樣品中表面與較深層的微生物會(huì )充分而迅速地驅趕到樣品懸液，形成菌濃度均勻的樣品稀釋液。這個(gè)是食品微生物定量檢測中均質(zhì)前處理的關(guān)鍵步驟。
在食品微生物檢測中最多的是檢測細菌總數，以高速振蕩均質(zhì)器為例，有以下幾大步驟：
1、 樣品的稀釋
1.1 用開(kāi)口器打開(kāi)均質(zhì)袋后一起放上電子天平，按“去皮鍵”，然后直接稱(chēng)取 25 g 樣品(固體/半固體/液體樣品)，再加入225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水。
控制面板可以用來(lái)自定義操作程序，可以保存20個(gè)程序，其中程序01肥肉：1分鐘; 程序02粉狀物：15 秒;程序03膏狀物：1分鐘;程序01，程序02，程序03是預先設置好的，不可以更改，其余每個(gè)程序可以通過(guò)控制面板進(jìn)行更改或更新。
根據樣品選擇均質(zhì)時(shí)間(一般30秒至2分鐘)，制成 1:10 的樣品勻液。
1.2 用1 mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取 1:10 樣品勻液 1 mL，沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 稀釋液的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面)，振搖試管或換用 1 支無(wú)菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成 1:100 的樣品勻液。
1.3 按.1.2 操作程序，制備 10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用 1 次 1 mL無(wú)菌吸管或吸頭。
1.4 根據對樣品污染狀況的估計，選擇 2 個(gè)～3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)， 在進(jìn)行 10 倍遞增稀釋時(shí)，吸取 1 mL 樣品勻液于無(wú)菌平皿內，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取 1 mL 空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內作空白對照。
1.5 及時(shí)將 15 mL～20 mL 冷卻至 46 ℃的平板計數瓊脂培養基(可放置于 46 ±1 ℃全不銹鋼恒溫水浴鍋WBK-4中保溫)傾注平皿，并轉動(dòng)平皿使其混合均勻。
2 培養
2.1 待瓊脂凝固后，將平板翻轉，36 ±1 ℃電熱恒溫培養箱HKP-9172A中培養48 h±2 h。水產(chǎn)品 30 ±1 ℃培養 72 h±3 h。
2.2 如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長(cháng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層 瓊脂培養基(約 4 mL)，凝固后翻轉平板，按 2.1 條件進(jìn)行培養。
3 菌落計數
可用肉眼觀(guān)察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計數器，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落 形成單位(colony-forming units，CFU)表示。
3.1 選取菌落數在 30 CFU～300 CFU 之間、無(wú)蔓延菌落生長(cháng)的平板計數菌落總數。低于 30 CFU 的平板記錄具體菌落數，大于 300 CFU 的可記錄為多不可計。每個(gè)稀釋度的菌落數應采用兩個(gè)平板的平均數。
3.2 其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(cháng)時(shí)，則不宜采用，而應以無(wú)片狀菌落生長(cháng)的平板作為該稀釋度的菌落數;若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個(gè)平板后乘以 2，代表一個(gè)平板菌落數。
3.3 當平板上出現菌落間無(wú)明顯界線(xiàn)的鏈狀生長(cháng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計數。
4 結果與報告
4.1 菌落總數的計算方法
4.1.1 若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內，計算兩個(gè)平板菌落數的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數，作為每 g(mL)樣品中菌落總數結果。
4.1.2 若有兩個(gè)連續稀釋度的平板菌落數在適宜計數范圍內時(shí)，按公式(1)計算：
4.1.3 若所有稀釋度的平板上菌落數均大于 300 CFU，則對稀釋度高的平板進(jìn)行計數，其他平板可記錄為多不可計，結果按平均菌落數乘以高稀釋倍數計算。
4.1.4 若所有稀釋度的平板菌落數均小于 30 CFU，則應按稀釋度低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
4.1.5 若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無(wú)菌落生長(cháng)，則以小于 1 乘以低稀釋倍數計算。
4.1.6 若所有稀釋度的平板菌落數均不在30 CFU～300 CFU之間，其中一部分小于30 CFU或大于300 CFU 時(shí)，則以接近 30 CFU 或 300 CFU 的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
4.2 菌落總數的報告
4.2.1 菌落數小于 100 CFU 時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數報告。
4.2.2 菌落數大于或等于 100 CFU 時(shí)，第 3 位數字采用“四舍五入”原則修約后，取前 2 位數字，后面用 0 代替位數;也可用 10 的指數形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數字。
4.2.3 若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計數，則報告菌落蔓延。
4.2.4 若空白對照上有菌落生長(cháng)，則此次檢測結果無(wú)效。
4.2.5 稱(chēng)重取樣以 CFU/g 為單位報告，體積取樣以 CFU/mL 為單位報告。
