培養基的分裝與儲存
發(fā)布時(shí)間：2024-05-22 瀏覽次數：262
培養基的分裝
培養基的分裝應根據使用的目的和要求分裝于不同的容器中，有的分裝后滅菌，有的則滅菌后再無(wú)菌操作分裝，但分裝量最大不宜超過(guò)容器容量的1/2，以免高壓滅菌時(shí)溢出或不能充分混勻。
1. 增菌培養基：分裝量約為容器容量的1/3~1/2，濃縮的培養基還可根據濃縮倍數減少分裝量。
2. 生化試驗培養基：一般使用10 x100mm試管每管分裝2~3mL。
3. 半固體培養基：分裝量約為試管長(cháng)度的1/3~1/2，滅菌后直立凝固備用。
4. 瓊脂斜面：分裝量約為試管容量的1/5，滅菌后趁熱放成斜面使之凝固，斜面長(cháng)度約為試管長(cháng)度的 2/3。
5. 瓊脂平板：將滅菌或加熱熔化的培養基冷至50℃左右，以無(wú)菌手續傾人滅菌平皿內，內徑9cm的平皿一般需傾注13~15mL(MH瓊脂應25mL)。注意傾注培養基時(shí)平皿要放平，以保證培養基均勻平鋪于皿底，并勿將皿蓋全啟開(kāi)，以免空氣中細菌及塵埃落入。新制備的平板培養基凝固后表面會(huì )形成一定量的凝集水，影響細菌的分離效果，通?？蓪⑵矫蟮箍塾?7℃培養箱內約30min，待培養基表面無(wú)水滴后使用。
分裝培養基時(shí)還應注意以下兩點(diǎn)：
(1) 各種分裝容器應清潔干凈，最好經(jīng)干烤滅菌后使用，以利于培養基的徹底滅菌。
(2) 每批培養基應另外分裝2支，每支10mL，隨該批培養基同時(shí)滅菌，以備測定該批培養基的最后pH之用。
培養基的儲存
制成的培養基，不宜保存過(guò)久，最好現用現配。確需儲存一定時(shí)間的培養基，每批應注明日期，嚴格密封置于2℃~8℃冰箱保存。試管培養基一般可保存3~6個(gè)月，平板培養基密封于塑料袋內可保存2~4周。我們將巧克力色血瓊脂，用一次性塑料平皿，密封儲存于2℃~8℃冰箱，1月內無(wú)明顯變化，接種腦膜炎奈瑟菌仍生長(cháng)良好。培養基的避光保存尤為重要，據報導，培養基日光直射15min，培養細菌時(shí)可能會(huì )導致細菌特性的改變。培養基不宜多次反復加熱。有的培養基不宜在冰箱保存，如用于無(wú)菌試驗的流體硫乙醇酸鹽培養基，因含有少量瓊脂，在低溫下易凝固，影響需氧菌生長(cháng)，若反復加熱，可能會(huì )產(chǎn)生絮狀物，影響結果的觀(guān)察。此培養基應放30℃以下的室溫避光保存，盡早使用。
干燥培養基在冷、暗、干燥處密封保存，保質(zhì)期可達2~3年。其保質(zhì)期長(cháng)短與培養基成分及其生產(chǎn)、儲存環(huán)境、密封程度密切相關(guān)。
不同的培養基保存時(shí)間存在差異，無(wú)論何種培養基，關(guān)鍵是保存條件和培養基質(zhì)量變化，只要發(fā)生濃縮、干裂、顏色變化、有菌生長(cháng)或干粉培養基潮解，就應廢棄不用。反之，經(jīng)測試質(zhì)量無(wú)變化時(shí)，仍可使用。
來(lái)源：《微生物培養基實(shí)用手冊》電子書(shū)
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