產(chǎn)品名稱(chēng):銅綠假單胞菌核酸快速檢測試劑盒
英文名稱(chēng):Rapid Detection kit for Pseudomonas aeruginosa
產(chǎn)品編號與包裝規格:
編號 | 規格 |
KJD01L | 24 測試/盒 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:本試劑盒基于環(huán)介導的恒溫擴增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),用于包裝飲用水等水體中銅綠假單胞菌的快速檢測,可借助顯色指示劑直接判讀結果。
檢測原理:利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結合處循環(huán)出現環(huán)狀單鏈結構,引物順利與模板結合并進(jìn)行鏈置換擴增反應,實(shí)現在恒溫條件下(60-65℃)進(jìn)行連續快速擴增。反應加入顯色指示劑,陰陽(yáng)性結果顯色差異顯著(zhù),可直接通過(guò)顏色變化判讀結果。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 快速簡(jiǎn)便:將酶、引物等反應組分混勻后進(jìn)行干粉化處理,增加試劑穩定性,使用時(shí)減少溶液配制步驟,更為便捷,整個(gè)檢測反應可在1 h內完成;
2. 特異性高:利用靶基因序列上的多個(gè)獨立區域設計多條引物,保證擴增反應的高度特異性;
3. 靈敏度高:最低檢驗限達到8 CFU/Test;
4. 判讀簡(jiǎn)單:反應前加入顯色指示劑,反應后通過(guò)肉眼觀(guān)察反應液顏色變化或者經(jīng)熒光監測儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結果,直觀(guān)方便,且可有效避免反應后開(kāi)蓋造成的氣溶膠污染。
銅綠假單胞菌核酸快速檢測試劑盒產(chǎn)品組分:
組分編號 | 組分名稱(chēng) | 規格數量 |
DRL01 | 檢測試劑(凍干) | 3排 × 8管 |
FRL04 | 復溶液 | 650μL × 1管 |
PRL01 | 陽(yáng)性對照(凍干) | 1管 |
SHR01 | 陰性對照(凍干) | 1管 |
SHR02 | 裂解液 | 1mL × 1管 |
SHR03 | 顯色指示劑 | 80μL × 1管 |
SHR04 | 超純水 | 1mL × 1管 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 |
儲存條件與保質(zhì)期:2~8℃條件下儲存,有效期為12個(gè)月。
適用儀器:
1. PCR儀器或金屬浴恒溫器,如果檢測樣品為DNA樣品,水浴鍋即可。
2. 高速離心機,樣品的前處理需要用高速離心機做分離。
樣品富集:
1. 樣品前處理:取250 mL待檢水樣進(jìn)行抽濾,后將濾膜置于100 mL含銅綠假單胞菌增菌肉湯中,前增菌8-12 h,對增菌液中的菌體富集用于LAMP快速檢測。
2. 適用樣品類(lèi)型:增菌液或者可疑菌落樣品。
3. 待測樣品存放:粗提的待檢DNA樣品保存于-4~0℃,不應該超過(guò)24 h;利用試劑盒提取的DNA樣品可在-20℃長(cháng)期保存,但應避免反復凍融。
銅綠假單胞菌核酸快速檢測試劑盒使用指南:
1,樣品前處理
A. 樣品增菌液模板DNA的制備:
a) 在檢測包裝飲用水等水體中的銅綠假單胞菌時(shí),吸增菌液1 mL到1.5 mL規格的無(wú)菌離心管中,6000 r/min離心5 min,棄上清用,50 μL無(wú)菌超純水懸浮洗滌沉淀1-2次,6000 r/min離心5 min,完全去除上清;
b) 取以上增菌液1 mL到1.5 mL規格的無(wú)菌離心管中,6000 r/min離心5 min,完全去除上清;
c) 12000 r/min離心15 min,上清即為粗提的DNA,可轉移至0.2 mL無(wú)菌離心管中,在-20℃下可長(cháng)期保存。
B. 可疑菌落模板 DNA 的制備:挑取可疑菌落,懸浮到含30 μL裂解液的無(wú)菌離心管中,后按照上述步驟b)、c)操作。
2,陰、陽(yáng)性對照和干粉試劑復溶
A. 陰、陽(yáng)性對照復溶:首次使用時(shí),加入80 μL超純水至陽(yáng)性對照和陰性對照凍干粉中,待溶解后混勻,-20℃存儲待用。
B. 干粉試劑復溶:取出凍干粉試劑,按照需求剪取n個(gè)檢測試劑管(n=待檢測樣品數+1管陽(yáng)性對照+1管陰性對照),每管加入20 μL復溶液,完全溶解后待用。
3,擴增反應
A. 打開(kāi)能夠提供恒溫條件的儀器,設置到64℃待用;
B. 向上述已加入復溶液的n個(gè)反應管中各加入顯色指示劑2.5 μL;
C. 向上述已加入復溶液的n個(gè)反應管中分別加入待測樣品核酸、陰性對照、陽(yáng)性對照各2.5 μL,蓋緊蓋子;
D. 將所有的反應管置于恒溫儀器中,反應50 min。
4,結果判讀:反應結束后,建議在自然光線(xiàn)充足的環(huán)境條件下,將樣品置于白色背景下觀(guān)察結果,陰性對照檢測試劑管呈淡橙色,陽(yáng)性對照檢測試劑管呈熒光綠,待測樣品反應管以此作為對照進(jìn)行判讀,若陰陽(yáng)對照反應管任一結果與上述情況不符,則本次檢測結果無(wú)效,應重新檢測或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系。
更多恒溫熒光法核酸快速檢測試劑盒 產(chǎn)品列表:
貨號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 用途 |
KJD02L | 糞鏈球菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 用于包裝飲用水等水體中糞鏈球菌的快速檢測 |
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KJD04L | 金黃色葡萄球菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 用于食品中金黃色葡萄球菌的快速檢測 |
KJD05L | 沙門(mén)氏菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 用于食品中沙門(mén)氏菌的快速檢測 |
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KJD07L | 單核增生李斯特氏菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 用于食品中單核增生李斯特氏菌的快速檢測 |
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KJD10L | 阪崎腸桿菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 用于食品中阪崎腸桿菌的快速檢測 |
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KJD16L | 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸快速檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌快速檢測 |