產(chǎn)品名稱(chēng):反轉錄酶(逆轉錄酶)
中文名稱(chēng):Reverse Transcriptase
產(chǎn)品編號與包裝規格:
編號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
HKE123-01B | 反轉錄酶(逆轉錄酶) | 10000U×5 | Reverse Transcriptase | 2870 |
產(chǎn)品描述:本制品是通過(guò)基因重組技術(shù)克隆表達M-MuLV的缺失突變型 RNase H-的反轉錄酶。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下幾種活性:依賴(lài)于RNA的DNA聚合酶活 性;依賴(lài)于DNA的DNA聚合酶活性;RNase H活性。由于RNaseH 能夠催化降解 DNA/RNA雜合體中的RNA,因此在cDNA第一條鏈 的合成反應中可能會(huì )降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的 RNase H活性缺失,延伸能力強,可用于較長(cháng)的cDNA合成,高比 例的全長(cháng)cDNA文庫的構建以及Real Time RT-PCR反應等。
反轉錄酶 產(chǎn)品用途:
1) 1st Strand cDNA的合成;
2) cDNA Probe的制備;
3) RT-PCR反應以及Real Time RT-PCR反應。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品反應 Buffer 中含有高濃度的 DTT,低溫下或者凍融可 能會(huì )導致沉淀析出,請恢復至室溫并輕搖混勻后使用。
Reverse Transcriptase 產(chǎn)品包裝(A包裝):
反轉錄酶 質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測僅可見(jiàn)清晰單一 目的條帶,PCR 方法檢測無(wú)大腸桿菌 DNA 殘留,無(wú)核 酸內、外切酶污染,無(wú) RNA 酶污染。
反轉錄酶 活性定義:以Poly(rA)?Oligo(dT)為模板/引物,在37℃、10 分鐘條件下,摻入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定 義為1個(gè)活性單位。
逆轉錄酶 操作方法與常用PCR循環(huán):
使用Reverse Transcriptase 注意事項:
1) 用DEPC處理實(shí)驗用到的所有實(shí)驗器材,或者 購買(mǎi)已經(jīng)證明無(wú)核酸酶的實(shí)驗用具,實(shí)驗過(guò)程戴手套 并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染。
2) 確保所用試劑及超純水中無(wú)RNA酶污染。
3) 純化過(guò)的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子, 乙醇和苯酚,以上成分會(huì )干擾第一鏈cDNA的合成反 應??刹捎靡掖汲恋鞷NA的方法去除掉痕量污染物。
4) 為保證反轉錄反應的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量 的RNA模板。