產(chǎn)品名稱(chēng)：克羅諾桿菌 PCR 檢測試劑盒
英文名稱(chēng)：PCR Detection Kit for Cronobacter spp.
產(chǎn)品編號與包裝規格：
| 編號 | 規格 |
|---|---|
| KJD08P | 24 測試/盒 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：本試劑盒基于 PCR 技術(shù)，依據國家標準 《GB 4789.40-2024 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 克羅諾桿菌檢驗》檢驗要求設計，適用于食品樣本中克羅諾桿菌的檢測。
克羅諾桿菌 PCR 檢測試劑盒檢測原理：利用克羅諾桿菌屬I(mǎi)TS基因的特異性引物和PCR反應所需試劑，如反應緩沖液、Taq DNA 聚合酶和dNTPs等，加入待檢核酸樣品，即可進(jìn)行 PCR 擴增反應。擴增產(chǎn)物電泳后在目標位置處檢測到特異性條帶時(shí)，即為陽(yáng)性結果。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 快速簡(jiǎn)便：將酶、引物等反應組分混勻后 進(jìn)行干粉化處理，增加試劑穩定性，使用 時(shí)減少溶液配制步驟，更為便捷，整個(gè)檢 測反應可在 2 h 內完成；
2. 特異性高：根據《 GB 4789.40?2024 食品微生物學(xué)檢驗 克羅諾桿菌檢驗》提供的目標基因引物，經(jīng)過(guò)大量的標準菌株的反復驗證，保證擴增反應的高度特異性；
3. 判讀簡(jiǎn)單：擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳和成像儀觀(guān)察目標條帶即可判別，直觀(guān)方便。
克羅諾桿菌 PCR 檢測試劑盒產(chǎn)品組分：
| 組分名稱(chēng) | 規格 × 數量 |
|---|---|
| 干粉試劑 | 8 管×3 排 |
| 復溶液 | 1 mL×1 管 |
| 陽(yáng)性對照 | 1管（凍干型） |
| 陰性對照 | 1管（凍干型） |
| 裂解液 | 1 mL × 1 管 |
| 超純水 | 1 mL × 1 管 |
| 6 × Loading buffer | 240 μL × 1 管 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
儲存條件與保質(zhì)期：2~8℃條件下儲存，有效期 12 個(gè)月。
所需其他材料和適用儀器：
1. PCR 儀器、高速離心機、電泳儀、水平電 泳槽、紫外儀、移液器、移液槍頭及離心 管等；
2. 瓊脂糖、溴化乙錠(EB)或其他核酸染料。
克羅諾桿菌 PCR 檢測試劑盒使用指南：
1，樣品前處理
1) 參照 《GB 4789.40?2024》,從克羅諾桿菌定性檢測步驟5.3開(kāi)始，使用 1 μL 接種環(huán)刮取TSA瓊脂平板上可疑菌落，懸浮到含 30 μL 裂解液的無(wú)菌離心管中，充分懸浮菌體，輕彈管壁消除氣泡，99℃加熱 10 min；
2) 12000 r/min 離心 15 min，上清即為粗提 的 DNA，可轉移至 0.2 mL 無(wú)菌離心管中， 在-20℃下可長(cháng)期保存。也可用等效商品化的細菌基因組DNA提取試劑盒或全自動(dòng)核酸提取儀按操作要求提取DNA模板。
2，加樣、反應
1) 首次使用時(shí)，分別加入80 μL 超純水至陽(yáng)性對照和陰性對照管中,充分溶解，4℃保藏時(shí)間不超過(guò) 48 h，-20℃存儲待用；
2) 取出凍干粉試劑，按照需求剪取 n 個(gè)檢測試劑管(n=待檢測樣品數+1 管陽(yáng)性對照+1 管陰性對照)，每管加入18 μL 復溶液，充分溶解后待用；
3) 向上述已加入復溶液的 n 個(gè)反應管中分 別加入待測樣品核酸、陰性對照、陽(yáng)性對 照各 2 μL ，緊蓋后置于 PCR 儀中按設定 的反應程序進(jìn)行擴增反應；
4) PCR 反應程序如下：
3，結果判讀：反應后每管中加入4 μL的 6×Loading buffer，混勻，并取 8 μL 樣品經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳，在凝膠成像儀下觀(guān)察，陰性對照無(wú)目的條帶擴增，陽(yáng)性對照中出現一條目標條帶，大小為282 bp (參照圖 1)，PCR 試驗結果成立。若陰陽(yáng)性對照管反應結果不符，則本次檢測結果無(wú)效，應重新檢測或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系。
克羅諾桿菌 PCR 檢測試劑盒使用注意事項：
1. PCR 實(shí)驗室區域設計、工作基本原則及 注意事項應參照《疾病預防控制中心建設 標準》(建標 127?2009) 和國家衛生和計劃生育委員會(huì )(原衛生部)(2010)《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》附錄(醫療機構臨床基因擴增檢驗實(shí)驗室工作導則)。
使用本試劑盒前請仔細閱讀本說(shuō)明書(shū)全文，檢測過(guò)程中建議穿潔凈工作服，戴一次性手套，使用的移液槍頭需提前滅菌；
3. 干粉檢測試劑在使用前低速離心，確保所 有的干粉沉在管底，加入復溶液如產(chǎn)生氣泡用手指輕彈管壁清除，反應前檢查反應 管是否蓋緊，避免泄露造成污染；
4. 試劑盒中反應管材質(zhì)為聚丙烯，包裝盒材 質(zhì)是紙，使用完畢廢棄時(shí)按照醫療廢棄物 相關(guān)規定處理，由使用者自行負責處理；
5. 不同批號的產(chǎn)品請勿混合使用，請在有效 期內使用試劑盒，由于操作不當引起的誤 判，以及由此誤判引發(fā)的其他事項，本公 司概不負責。
