―― 070040大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒(12種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的12種試劑(表1)、10瓶0.85%無(wú)菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)出血性大腸桿菌O157:H7生化鑒定盒的詳細使用方法
出血性大腸桿菌O157:H7為革蘭氏陰性桿菌,需氧或兼性厭氧,有周鞭毛,并有菌毛,不產(chǎn)生芽孢的桿菌。發(fā)酵乳糖,不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨醇;氧化酶陰性;MUG陰性。
從可疑肉湯培養物轉接營(yíng)養瓊脂分離培養,將疑是腸桿菌科的新鮮菌苔置于已配備的無(wú)菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ), 37℃培養18-24h,用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養箱中培養,結果觀(guān)察見(jiàn)表1。注意:如有特殊的接種方式、培養時(shí)間或培養方式,請詳見(jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
凡符合上述大腸桿菌O157:H7生化反應的純菌落,經(jīng)用抗E.coli O157:H7標準血清或EHEC O157:H7乳膠凝集試劑測試呈陽(yáng)性結果,即可報告為該食品試樣中檢出腸出血性大腸桿菌O157:H7。